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如何分析光谱图的高i效液相色谱？

实际上色谱图只是简单地说一个横坐标就是时间纵坐标是电信号的二维图谱。

高i效液相色谱法，你可以简单想象一下，固定相是一种多空海绵状的柱形结构，样品从孔中流出。由于各物质吸附能力不同，因此在色谱图上就会出现差异。

有关试验参数：

其保留时间为溶质通过色谱柱的时间。这个特征可以在一种混合物的多个部分中i共享，这也是为什么要使用 MS方法。得到的色谱图显示了强度和保留时间的关系(存在的组分)。

1.保留时间：即可定性的数据参数

若用相同的柱子，相同的流动相，分析相同的样品，则该样品的保留时间，应固定。在不同保存时间的色谱峰上，显示的是不同的物质。若要采用反相色谱法，则色谱峰越远，其对应物质的极性就越小。

2、峰面积：即可量化的数据参数

在滤波后进行峰值检测，其中峰值表示成分或成分的断裂。峰顶可根据覆盖的高度或面积选择。根据已知峰与存在峰的匹配，我们可以用眼睛来识别某些峰。它有助于确定分子的存在，或者分子中有多少原子的存在。

高i效液相色谱高i效液相色谱常见类型有哪些？

其中两种至常见的高i效液相色谱为正相高i效液相色谱和反相高i效液相色谱。

正相高i效液相色谱：

柱子中填充微粒二氧化硅和非极性溶剂，如正己烷。一个典型的柱长在150到250 mm之间，其内径小于4.6毫米。由于极性化合物在极性二氧化硅表面的粘附时间较长，混合物中的非极性化合物通过色谱柱的速度加快。

反相高i效液相色谱：

在柱子中填充二氧化硅粒子，并对其进行改性，使长碳氢链(8~18个 C原子)附着在表面，从而达到非极性。用极性溶剂，如水、醇、甲i醇等。因为在极性溶剂和极性分子之间有很强的吸引作用，混合物中的极性化合物会更快地穿过色谱柱。在通过色谱柱时，非极性分子的速度减慢。他们对烃基的吸引主要是通过范德华分散力和疏水作用产生不同程度的吸引。其在流动相中的溶解度也较低，这有助于它们与烃基的相互作用。

反相高i效液相色谱是目前使用至广泛的高i效液相色谱技术。

在高i效液相色谱分析中，常采用和配制流动相。常用的高i效液相色谱法***至好是***，如色谱纯化***等。当要求不太严格时，纯级甚至是分析纯的***都可以使用。紫外检测器是常用的高i效液相色谱分析方法，因此，应从降低基线噪声和提高分析灵敏度的角度考虑，采用紫外吸收小、杂质少的纯紫外吸收剂。

1.过滤流动相。在使用前，准备好的流动相要用0.5 um口径的微孔滤膜进行过滤。因为溶液中含有许多用肉眼很难发现的微粒，如果不滤除它们，泵口、柱头上的过滤器就会堵塞，从而阻塞了流动相的正常通道，使色谱柱的阻力增大，柱效降低。遇到此情况时，换用过滤过的流动相，拆开堵塞过的过滤器，浸在20%的水溶液中，用超声波清洗机清洗20分钟，以除去滤片上的堵塞。

2、流动相的脱气。在使用之前，必须先除气，以便尽可能地去除溶解在流动相中的气体，否则，这些气体会使柱填料的性能下降，并对检测器的信号产生较大的干扰。目前，各种脱气方法有超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。目前应用至多的是真空脱气法和氮气流法。在无气状态下，水与混合时会产生大量的气泡，气泡会进入色谱柱和检测器中，影响分析工作的正常进行。