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张燕华 女士
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发布时间:2021-12-20 01:28:18
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助推***治i疗- SCIEX毛细管电泳多重表征综合应用方案:
通过在 DNA和 mRNA水平上对致病***进行修正从而达到i效果,与传统药相比,对于一些不具药i效的靶点具有的优势,因此***治i疗对特定***引起的疾i病有很大的应用潜力,其中肿i瘤和罕见病是***治i疗至主要的应用领域。***治i疗药 Gendicine在中国于2004年被 FDA批准上市,成为世界上第i一个商业化的***治i疗产品,这是世界上第i一个上市的***治i疗产品。溶瘤病毒产品 Oncorine也于2005年在中国获批上市,目前已有300多种***治i疗产品已经上市,或正在 FDA和 EMA的监管下进行研发,这些***治i疗产品都涉及持续的编码蛋白质 DNA转移,利用多种体内外技术。
SCIEXP800 Plus药分析系统可广泛用于质粒 DNA纯度分析、腺相关病毒(A***)、腺相关病毒(A***)衣壳蛋白的纯度分析、腺相关病毒的等电点分析、宿主细胞残留 DNA的片段分布分析等多个方向
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近视是一种日益普遍的眼病,它会导致人们在观察远处物体时变得模糊。利用蛋白质组学技术,香港科学家对影响眼睛正常发育和导致近视的因素进行研究。
蛋白组学是指在特定***状态下所涉及到的大量蛋白质,并从中找到影响人类和动物正常发育的外部环境或遗传因素。香港科技大学视光学院副 利用蛋白质组学技术,对多种眼疾进行研究,特别是近i视眼。该人描述了他在实验室里如何利用 SCIEX仪器进行研究:“我大约15年前从香港理工大学毕业,拿到了博士。长期以来,我对近视的研究非常感兴趣,这是我攻读博士期间研究的***。但是在这之前,我们完全了解了蛋白质组学以及这项技术能够为我们提供更深入的信息。蛋白质组学对很多临床研究非常有用,如近视、青i光眼、黄斑变性、i感i染等。在蛋白质组学的研究中,发现新蛋白质间的相互作用可能会给带来更好的方法,因此我决定要在这方面进行一次探索。”
“眼睛是这类蛋白质组研究的理想模型,我们可以将一只病眼与一只健康的眼睛直接进行比较,因为它们的遗传模式是相同的。研究期间,曾用2- D凝胶技术来分析动物眼睛里的蛋白质,这非常耗时。但是到那时,几乎没有其他方法可供选择,对利用蛋白质组研究近视的技术几乎一无所知。另外,某些***类型(如眼液)不能使用凝胶技术,这限制了我们的工作。只是在几年之后,人们才开始从使用二维凝胶技术转向使用液相色谱-质谱法,这促使我在7年前左右购买了离子阱和MALDI-TOF质谱仪。遗憾的是,我没有时间去理解这个系统的复杂性,这使我在硬件和软件使用上遇到困难,导致蛋白质组学研究被搁置数年。但是这些都是在我接触 SCIEX之前发生的。
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在高i效液相色谱分析中,常采用和配制流动相。常用的高i效液相色谱法***至好是***,如色谱纯化***等。当要求不太严格时,纯级甚至是分析纯的***都可以使用。紫外检测器是常用的高i效液相色谱分析方法,因此,应从降低基线噪声和提高分析灵敏度的角度考虑,采用紫外吸收小、杂质少的纯紫外吸收剂。
1.过滤流动相。在使用前,准备好的流动相要用0.5 um口径的微孔滤膜进行过滤。因为溶液中含有许多用肉眼很难发现的微粒,如果不滤除它们,泵口、柱头上的过滤器就会堵塞,从而阻塞了流动相的正常通道,使色谱柱的阻力增大,柱效降低。遇到此情况时,换用过滤过的流动相,拆开堵塞过的过滤器,浸在20%的水溶液中,用超声波清洗机清洗20分钟,以除去滤片上的堵塞。
2、流动相的脱气。在使用之前,必须先除气,以便尽可能地去除溶解在流动相中的气体,否则,这些气体会使柱填料的性能下降,并对检测器的信号产生较大的干扰。目前,各种脱气方法有超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。目前应用至多的是真空脱气法和氮气流法。在无气状态下,水与混合时会产生大量的气泡,气泡会进入色谱柱和检测器中,影响分析工作的正常进行。
高i效液相色谱通常由输注系统(泵)、进样系统、分离系统(柱)、检测系统、数据处理系统组成。以下简要说明各部分:
1、输注系统(高压泵)及其重要性。
高电压泵是其中的关键部件,根据原理可分为两大类:一为恒流泵,一为恒压泵。不管色谱柱的阻力如何变化,不管外界如何影响恒流泵,它所输出的流动相的流速可以基本保持不变,这正好是 高i效液相色谱系统工作的基本要求;而恒压泵所输出的基本压力是恒流的,在正常情况下,恒压可以达到恒流的效果。但由于色谱柱、温度等可能发生变化,因此可能导致流量变化, 高i效液相色谱用户不希望看到这种情况。因此通常来说,恒流泵比恒压泵好(用过的横流泵多于用恒压泵)。高电压水泵的质量直接影响到整个 高i效液相色谱的质量,是用户关心的核i心部分之一。高i效液相色谱高压泵的重要性和用户对高压泵的具体要求如下:
(1)耐高压。
耐压性是 高i效液相色谱系统对高压泵的基本要求之一,其平均粒径约4微米左右,在5 mm左右的色谱柱中,在流动相速度为1-3 mL/min时,需要达到34.47-41.36 Mpa (5000-6000 psi)。但是,随着填料粒径的不断减小,超高压液相色谱柱要求耐压能力较高,粒径为1-2.5μ m的无孔色谱填料的应用得到推广,从而使流动相在色谱柱中的阻力增大。现在市场上已经有达到68.94 Mpa (10000 psi)的高压恒流泵(例如: Altex 100 A)。
(2)稳定,低波动。
输注高压泵的稳定性和脉动的大小直接影响 高i效液相色谱系统的稳定性(漂移和重复性)、影响系统的噪声、降低灵敏度,尤其是 高i效液相色谱系统采用电化学检测器、示差检测、梯度分离等检测器,以及梯度分离等,因此目前国际上许多高压泵的压力脉动都可以控制在1%以内。
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