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以下列出了一些色谱柱的清洗溶剂和顺序，作为参考：以正已烷(或庚烷)、和的硅胶柱依次冲洗，然后按相反的顺序冲洗，所有的溶剂必须严格脱水。可以清洗掉残留的强极性杂质，并对硅胶表面进行活化。反相柱用水、、、(或)依次冲洗，然后按反序冲洗。若下一步分析所用的流动相不含缓冲液，就可以忽略一步用水冲洗。可洗去残留的非极性杂质，多次在()冲洗时多次***100-200μ l四氢，有助于去除强疏水性的杂质。四氢与或混合溶液可去除类脂。有时候还要***几次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脱可去除蛋白质污染。用稀酸缓冲洗阳离子交换柱，用稀碱缓冲液冲洗，把交换性能很强的盐去掉，再用水、、(除去固定相表面吸附的有机物)、、水，依次冲洗。

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保存色谱柱时，柱中应充满或，柱连接处应紧固，防止溶剂挥发干燥。请勿将缓冲液留在柱内待一夜或更久。8、在使用色谱柱时，如果压力升高，有一种可能是烧结过的滤片被堵塞，此时应更换滤片或取出清洗；还有一种可能是大分子进入柱内，使柱头受到污染；如果柱效降低或色谱峰变形，可能会出现柱头塌陷，体积增大。当出现后两种情况时，小心将柱头接头拧开，用洁净的小钢将柱头填料取出1~2 mm的高度(注意将污染的填料取净)再将柱内填料整平。接着将其填充到色谱柱中，用合适的溶剂润湿固定相(与柱相同)，压平，然后拧紧柱接头。这种处理后柱的效能有所提高，但难以***到新柱水平。柱失效一般为柱端，在分析柱前安装与分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米)，可起到保护、延长柱寿命的作用。使用保护柱会失去一些柱效，这是值得的。

色谱柱一般用硅胶作基质，只能在pH2-9的范围使用。柱使用一段时间后，可能会有一些吸附作用强的物质留在柱顶，尤其是一些有色物质更容易在柱顶的填料上看到。在使用一段时间后，新的柱顶填料会塌陷，使柱效降低，此时还可补加填料，使柱效***。如 ODS柱，在每次工作结束后用强力洗脱剂，如 ODS柱，以冲洗到基线平衡。用盐缓冲液作流动相时，用完后用无盐流动相冲洗。含有卤族元素的化合物(氟、氯、)可能对不锈钢管道造成腐蚀，不适合长时间接触。HPLC仪柱式安装如果不经常使用，应每4-5天开一次电源，冲洗15分钟。

探测器的维护1.光源部分探测器的重要组成部分是光源，光源对发射能量有要求，一旦能量衰减到一定程度，就会出现一系列影响光源使用的问题，如基线噪声变大、灵敏度下降等。一般 UV灯的使用寿命为2000 h，当达到这一时，我们就特别注意灯的能量状况，可通过仪器维护软件中自带的“灯能测试”功能判断，测试结果将分别评估低、中、高三个波长段的能量，一旦某一波长段测试结果显示失败，就表示需要更换灯。2.检测池探测器的另一个重要组成部分就是检测池，也称为循环池。一般来说，检测池是大家比较关心的问题之一，因为检测池的耐压能力一般都不高，所以一旦被堵住，很容易造成损坏。实际上，检测池一般不太容易堵塞，因为几乎所有的颗粒杂质都会被色谱柱截获，因此堵塞检测器的东西基本不是来自样品，很可能是后来“产生”，例如，含盐流动相残留在检测池中导致盐析出。六、废液处理LC废液中大部分含有，对***有一定的危害，对环境也会造成污染，严禁随意倾倒，应及时处理。当前，国内大多数实验室都是把废液运往废液处理站进行无害化处理。

3说完溶液后，我们还要注意瓶本身，通常瓶子的盖子上都会有一些小孔，让流动相管道通过，但不知为什么要多开几个？有些用户会把这个小洞堵起来，这是防止挥发降低实验室污染，防止灰尘进入流动相瓶，但是如果这些小孔被完全堵住，再加上瓶盖拧得很紧，有可能出现流动相吸液不畅的情况下，因为瓶子里完全和大气压隔离！要解决这个问题，其实大家可以咨询厂家购买一种叫“安全瓶盖”的东西，能防止挥发和灰尘的挥发，也不用担心会堵住空气。1.4一个，是溶剂瓶内的过滤头，其作用是防止溶剂瓶内的颗粒杂质进入设备的流道系统，过滤孔径为0.45 um，材料分为玻璃烧成石英和不锈钢两种，如果这件东西脏了，也会造成流动相吸液不畅，可以进行清洗，用稀泡过夜；不锈钢材质可以直接清洗。

下一步为脱气，脱气的作用是将溶解在流动相中的气体去除，因此我们必须从气体开始说：2.1怎样才能让脱气机地运转，好的办法是“帮它一把”，其实就是在脱气机中预***行过一次脱气，流动相配好后，超声波清洗机中脱气几分钟，可以大大减少脱气机脱气机的工作负担，因为脱气机中溶解气体的脱气于脱气机能处理的大值(特别是在高流速的情况下)，气体去除不干净，这时就有可能在混合时产生气泡影响仪器压力波动和噪声。2.2除气机除了怕脱不干净外，还怕堵塞，脱气的机会堵吗？一般不会，但长了个长假后，就不好说了，是堵住脱气机的罪魁祸首，还是流动相里的微生物，***藻类，如果他们在一台脱气机里呆上几天，一天之内，脱气机的排气管里可能布满了一种“水藻”然后就堵住了，脱气机要特别注意的是，在长时间不使用仪器的时候，如国庆节假期，一定要把水相管路中的溶液替换成，防止“长草”。