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LC是一种在实验室中使用频率很高的仪器设备，在使用过程中会有很多小技巧，一些小的注意事项，今天就按照 LC构成部分：流动相溶剂瓶→高压泵→进样器→色谱柱→检测器→废液，这个顺序一一说明了如何做***？流动相溶剂瓶的维护作为流动相起始点的溶剂瓶，通常被盛放水或有机相溶液。1、水相溶液，对于水相溶液，首要问题是防止污染。对溶剂瓶我们要做的很重要的工作就是勤换流动相，常换常新。2、有机相溶液，对于有机相溶液，不必担心***繁殖的问题。但有机相易聚合，尤其是在合适的光照条件下极易聚合，在瓶中会出现絮状聚合沉淀。为防止聚合过程的发生，装时使用棕色溶剂瓶，避免阳光直接照射，更换时应去除瓶底剩余溶液。3、清洗过滤，溶剂瓶内的过滤头，其作用是防止溶液瓶内的颗粒杂质进入仪器的流路系统，其材料一般分为烧结玻璃石英和不锈钢两种，若不慎堵塞将导致流动相吸液不畅，因此必须进行清洗，玻璃材料通常用稀泡，不锈钢材料的可以直接进行超声清洗。

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高压泵维修泵浦是液相色谱的核心，该泵将流动相从溶剂瓶输送到液相流路系统，以保证其流量和压力的稳定。高电压泵的正常状态是液相色谱准确分析的基础，因此平时一定要重视泵的***。1、泵压波动，很多情况下，泵的问题都反映在压力上，压力波动也是一类常见问题。一般情况下，我们可以通过重新清洗流道和再次脱气来解决。2、滤清器白头***，在泵维修中还有一项常做的工作是更换清洗阀上的过滤白头，通常判断纯水清洗时的流量为5 mL/min，如果压力超过1 MPa，可考虑更换。

坡度洗脱的流动相选择不当要注意溶剂的溶解性，不相容性溶剂不能作为梯度洗脱的流动相。部分溶剂混溶于一定比例，超过一定范围后就不能互溶，使用时更要注意。同时，在与缓冲溶液混合时，也会发生与缓冲剂混合，在使用过程中需要特别注意。不计空白梯度洗脱为保证良好的重复性，梯度洗脱的溶剂纯度要求较高。由于弱溶剂中的杂质在色谱柱上被强溶剂洗脱，在分析样品之前，必须对样品进行空白梯度洗脱，识别溶剂杂质峰。分级洗脱溶剂需要完全脱气，以防止在混合过程中产生气泡。没有考虑溶剂混合引起的粘度变化由于混合溶剂的粘度随组分而变化，因此，在梯度洗脱过程中常常会发生压力变化。比如，和水的粘度都比较小，当它们以相似比例混合时，粘度增加很大，这时的柱压比或水为流动相时大一倍。所以在梯度洗脱时要注意防止压力超过输液泵或色谱柱可以承受的大压力。

六通阀的正确使用与维护①样品进样前，要用0.45μ的滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。②旋转阀芯时不要太慢，不要停留在中间位置，否则流动相受阻，使泵内压力急剧上升，甚至超过了泵的大压力；再转到进样位置，过高的压力会使柱头损坏。③为了防止进样阀内的缓冲盐及样品残留，每次分析结束后应冲洗进样阀。一般可采用清水冲洗，或先用溶样溶剂冲洗，再用清水冲洗。

用不同的方法对色谱柱会有不同的要求，但是每一种色谱柱都有其清洁要求，这在色谱柱上可以找到，必须按照以上的要求来进行，否则会导致色谱柱效下降，色谱柱的使用寿命缩短，检测波长会因品种的不同而有不同的要求，这里需要指出的是要注意观察检测器灯能量的变化，如基线波动大，活性成分的响应值突然变小等，对检测器电镜能量的变化，要注意观察到检测器中能量的变化，如基线波动大，活性成分的响应值突然变小等，有可能是由于灯的能量不足导致的，所以实际使用时要根据实际情况更换。流动速度也因品种而异，一般为1.0 ml/min，流速不能随意改变，尤其作为 QC人员，但作为研发人员，有时为了摸索条件或进行方法耐用性验证，会改变流速来评估该方法的适用性。对不同品种的进样量也有不同的规定，进样量这个现在都是自动进样，所以进样精密度都是很好的，不用特别强调。

操作员：，作为液相操作人员，必须认真学习夜想说明书，掌握液相硬件和软件的操作，掌握日常维护，掌握基本故障的排除与维修。普通液相的操作规程也是由操作人员起草的，因此只要严格按照操作要求操作，一般都不会出现问题，当然对液相的日常维护维护来说，特别是对液相的日常维护***来说，要注意的是液相的日常维护***，泵密封垫的清洗、系统的清洗、溶剂过滤头的清洗等方面都不会出现问题，尤其是对液相的日常维护，不会造成不必要的麻烦。第二，操作者在配制液相分析样品时，好由同一人单独完成，以免不必要的意外误差。4、液体安装环境：仪表应尽量安装在水平位置，远离振动、电磁干扰的屋内，有条件时尽量把液相数据处理系统分开，一方面是防止色谱基线噪声太大、基线不稳等，一方面是为了减少对***的危害。

泄漏原因分为两种：(1)不正确的接触硬件。如流路管或柱子等更换部件，换接头接口不匹配，造成漏液。要注意的是，不同的公司有许多柱接头。PEEK接头当然是一种较好的解决方案，不仅通用性好，而且用手拧也能保证不漏液。值得一提的是现在有很多厂家都出了手拧线，只能用手拧一下，用扳手力量过大造成损坏，所以要把握好力度，避免拧得太紧或太松。变形导致漏液，未对好螺纹，用力过大而引起漏液。

不恰当的使用若为输送泵漏液，常见的原因是活塞位置缓冲盐析所致。造成液相泄漏、转子磨损、析出的原因有两个，一是在使用缓冲盐溶液时突然加入纯而析出，这种错误很容易避免，在使用仪器时要注意目前系统的流动相是什么，如果是缓冲盐，不能直接换纯有机相，会导致盐析出，造成系统色谱柱堵塞。首先需要10%的有机相水。交换纯有机相的过程。另外一种是在使用缓冲盐溶液(无论含量多少)作为流动相时，实验结束后不需要换水冲洗，从而使流动相干燥，形成晶体。为避免这种现象发生，在使用缓冲盐进行流动相后，必须先用90%的水、1 ml/min的流速冲洗系统至少30分钟，将缓冲盐置换出来，再用纯有机相冲洗30分钟，将系统保存在纯有机相中，起到保护系统和柱子的作用。